分光光度计(spectrophotometer)是一种测量物质的吸收或透射比例随波长变化的仪器。该设备通过对样品中不同波长光的吸收或透射比例,可以得到物质在不同波长下的吸收谱或透射谱,从而获得许多有关样品的信息。
1.分光光度计原理
分光光度计基于比尔伯‐朗定律,即溶液中的吸收与物质浓度成正比,与光程长度成正比,与吸收介质的本质和所用波长有关。当电磁辐射穿过介质时的吸收或透射程度,跟介质本身的特性、路径长度和波长有关。学术上,其中一个常见的使用方式是:测基准样品吸收率,并将其作为未知样品测量结果标定的参照系数,此方法叫做外标法。
2.分光光度计的组成
分光光度计的主要部件包括:入射光源(通常是Xenon闪光灯)、单色器(调节波长)、光路系统(如样品池), 检测器(如移液器), 以及数据分析软件。其中最重要的是单色器,在很大程度上决定了其波长选择能力和分辨率。
3.分光光度计的用途
分光光度计广泛应用于生化、药学、物理、环境及材料等科学领域。它可以用于测量许多种分子,如蛋白质、核酸碱基、有机分子、无机离子、金属离子等。分光光度计可用于测定样品浓度、反应动力学特性、反应热力学性质、溶解度等。
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