等电聚焦电泳

等电聚焦电泳是一种生物化学分离技术，主要用于分离和纯化带电的生物大分子如蛋白质、核酸等。相比于其他方法，等电聚焦电泳具有高分辨率、高重复性和高通量等优势。

1. 等电聚焦电泳名词解释

   等电聚焦电泳是指将待分离的大分子（如蛋白质）在电极场的作用下，聚焦到等电点位置进行分离的一种技术。在等电点位置，分子的净电荷为零，会发生停滞或悬停现象，进而实现分离。该技术需要借助等电聚焦板进行实现，利用板中由多种缓冲液形成的 pH 梯度，在电极作用下使大分子浓度高的样品在 pH 值逐渐增大的梯度中向更高 pH 值处迁移，直至达到等电点被分离出来。

2. 等电聚焦电泳的原理

   等电聚焦电泳利用 pH 值梯度和电场的作用，将带电生物大分子沿着 pH 梯度移动到等电点上进行聚焦分离。通常使用的实验装置是一个等电聚焦板，其内部设有缓冲液随 pH 值逐渐变化的 pH 梯度，并有正负两个电极使缓冲液呈现水平方向的电场。将待检测样品施加于模板一端，通过顺序施加电压，首先对样品中存在的离子进行IEF（等电聚焦）的初步分离，之后可以对ISF（溶胶聚集）初始分离的多肽或者核酸片段进一步的分离。

3. 等电聚焦电泳的特点

   等电聚焦电泳具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。在 IEF 过程中通过 pH 值梯度的形成，能够有效地将带电小分子、蛋白质等分离开来，在样品量少的时候也可以准确检测。此外，等电聚焦电泳还有一个重要应用是对已知电荷状态的蛋白质进行定量分析，如凝胶条滴液分析的方法。